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氨基柱的使用方法有哪些?

欄目:行業(yè)資訊 發(fā)布時間:2022-01-24
液相色譜柱的固定相可以說是五花八門,有C18,C8,C4,苯基柱,氰基柱,氨基柱等等。色譜柱使用的好壞,直接關(guān)系到分析分離的結(jié)果,我們都知道氨基柱有使用壽命短等問題,今天在這里給大家?guī)戆被氖褂弥改?,讓我們手中的色譜柱發(fā)揮出更大的作用。

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氨基柱

  1、由于新的氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中,與反相流動相是不互溶的,因此如果使用反相的方法,必須用至少10倍柱體積的異丙醇沖洗過渡(約2h,0.5mL/min),以除去正相保存溶液。過渡過程中注意因異丙醇粘度較大,會導致柱壓很高,適當調(diào)低流速即可。

  2、再用至少10倍柱體積95%水-5%乙腈(或甲醇)沖洗(不含緩沖鹽的流動相可省去)過渡,后用流動相平衡。

  3、用完后洗柱時,必須先用95%水沖洗至少10倍柱體積,除去所用緩沖鹽(不含緩沖鹽的流動相可省去)。然后保存于乙腈/水(80:20)溶液(一個月內(nèi))中。長期不用的話,建議用異丙醇保存(一個月以上)。

  4、新柱子一定要置換掉保存溶液,用異丙醇保存的柱子在使用前也需要花一定的時間給置換掉。

  5、反相條件下使用時,要特別注意控制pH值范圍(根據(jù)你色譜柱耐受使用pH),pH值越低越有發(fā)生水解的危險,流動相中水的比例越高當然也越有發(fā)生水解的危險。

  6、還有一種情況是,當使用氨基柱進行酸性物質(zhì)的分析時,酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在,可能會使略帶負電荷的氨基官能團質(zhì)子化,導致使用一段時間后對于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。---------建議用10-15倍的柱體積的為pH=11 NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱(沖洗后當然要再用不含堿的流動相洗去多余氨),之后再進行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如0.1%。


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